Περιεχόμενο
Η χρωματογραφία χρησιμοποιείται ευρέως σε χημικά εργαστήρια για τον προσδιορισμό της ταυτότητας ενός άγνωστου συστατικού. Αυτό το συστατικό ρέει μέσω του υλικού περιτυλίγματος στηλών και αλληλεπιδρά με τα σωματίδια. Οι αλληλεπιδράσεις μεταξύ των σωματιδίων και των συστατικών του δείγματος βασίζονται στην έλξη ή διαλυτότητα μεταξύ τους. Μόρια που δεν έχουν αλληλεπίδραση με τα σωματίδια του υλικού της θήκης επιτρέπεται να περάσουν μέσα από αυτό χωρίς εμπόδια. Ο χρόνος που απαιτείται για να περάσουν τα μόρια από το σημείο έγχυσης στο σύστημα στη μέγιστη κορυφή ενός μη αντιδραστικού μορίου είναι ο νεκρός χρόνος της στήλης.
Βήμα 1
Ενισχύστε το άγνωστο δείγμα με μια μικρή ποσότητα μιας ένωσης που δεν συγκρατείται από το υλικό της στήλης. Η ένωση θα περάσει μέσω της στήλης χωρίς αλληλεπίδραση με το υλικό περιτυλίγματος στη στήλη.
Βήμα 2
Τοποθετήστε τη σύριγγα με περίπου 20 μικρολίτρα του δείγματος και εισάγετε τη βελόνα της σύριγγας στη θύρα έγχυσης. Τοποθετήστε το βρόχο δείγματος από τη βαλβίδα αδειάζοντας τη σύριγγα στη βαλβίδα.
Βήμα 3
Ενεργοποιήστε το όργανο χρωματογραφίας και ξεκινήστε την κινητή φάση. Αυτή η φάση ρέει μέσω του οργάνου και παίρνει το δείγμα μέσω της στήλης και του ανιχνευτή που καταλήγει σε ένα δοχείο αποβλήτων.
Βήμα 4
Ενεργοποιήστε τη βαλβίδα, η οποία επιτρέπει στο δείγμα να εισέλθει στη διαδρομή ροής υγρού. Αυτό φορτώνει τα συστατικά δείγματος στην κορυφή της στήλης και ξεκινά ο διαχωρισμός.
Βήμα 5
Παρακολουθήστε το σήμα εκπομπής του ανιχνευτή και εντοπίστε την πρώτη κορυφή του χρωματογράφου. Η διαφορά μεταξύ του χρόνου έγχυσης και του μέγιστου της πρώτης κορυφής, που αντιπροσωπεύεται από το στοιχείο ενίσχυσης, είναι ο χρόνος νεκρού.
Βήμα 6
Μετρήστε την απόσταση μεταξύ του σημείου ένεσης και του μέγιστου ύψους της πρώτης κορυφής. Πολλαπλασιάστε την απόσταση με την ταχύτητα του χαρτιού ή τον άξονα για να βρείτε τον νεκρό χρόνο.