Περιεχόμενο
Το UFC σημαίνει Colony Forming Units, έναν όρο που χρησιμοποιείται στη μικροβιολογία για τον ποσοτικό προσδιορισμό του αριθμού των βακτηρίων που υπάρχουν σε ένα διάλυμα. Ανάλογα με τη συγκέντρωση του δείγματος, θα χρειαστεί να εκτελέσετε πολλαπλές αραιώσεις και να τοποθετήσετε τα δείγματα σε τρυβλία Petri. Εάν υπάρχουν πολλές αποικίες βακτηριδίων, η μέτρηση θα είναι δύσκολη και αν υπάρχουν λίγες, το δείγμα μπορεί να μην είναι αντιπροσωπευτικό. Είναι γενικά καλή ιδέα να τοποθετήσετε δείγματα του αρχικού διαλύματος στις πλάκες, μία αραίωση 1/10 (1 μέρος διαλύματος και 9 μέρη αλατούχου διαλύματος), μία αραίωση 1/100 και μία αραίωση 1/1000.
Υπολογίστε CFU από βακτηριακές αραιώσεις
Βήμα 1
Εκτελέστε μια προκαταρκτική μέτρηση κάθε πλάκας μετά τον χρόνο επώασης των βακτηρίων, συνήθως μία ή δύο ημέρες. Θα πρέπει να μετράτε μόνο μεμονωμένες αποικίες, οι οποίες θα πρέπει να είναι ξεχωριστά μεμονωμένα σημεία και όχι σύνολα αποικιών που αναπτύχθηκαν μαζί. Επιλέξτε την πινακίδα που έχει περισσότερες από 30 και λιγότερες από 300 αποικίες.
Βήμα 2
Μετρήστε τον αριθμό των μεμονωμένων αποικιών. Αυτός είναι ο αριθμός UFC της αραίωσης - πρέπει να εκτελέσετε έναν απλό υπολογισμό για να προσδιορίσετε το UFC από το αρχικό δείγμα σας. Για αυτό το παράδειγμα, θα χρησιμοποιηθεί μια υποθετική πλάκα που περιέχει 46 αποικίες.
Βήμα 3
Προσδιορίστε το μέγεθος της αραίωσης που χρησιμοποιήσατε. Στην ιδανική περίπτωση, θα πρέπει να επισημάνετε τα πιάτα Petri στην αρχή του πειράματος. Για αυτό το παράδειγμα, μπορεί να έχετε αναμίξει 1 ml της βακτηριακής καλλιέργειας με 99 ml αλατούχου διαλύματος. Αυτό σχηματίζει αραίωση 1/100.
Βήμα 4
Πολλαπλασιάστε τον βαθμό αραίωσης με το ποσό που βάζετε στο πιάτο. Εάν σε αυτό το παράδειγμα βάλετε 0,1 ml της αραίωσης 1/100 στο άγαρ, πρέπει να πολλαπλασιάσετε 0,1 x 1/100 για αποτέλεσμα 1/1000 ή 0,001.
Βήμα 5
Διαιρέστε τον αριθμό UFC της αραίωσης (αριθμός αποικιών που μετρήσατε) με το αποτέλεσμα που λήφθηκε στο βήμα 4. Για αυτό το παράδειγμα, θα διαιρέσατε το 46 με το 1/1000, το οποίο είναι ίδιο με τον πολλαπλασιασμό επί 1000. Το αποτέλεσμα είναι 46000 UFC σε πρωτότυπο δείγμα.